同源異體小鼠腫瘤模型是免疫腫瘤學(xué)(I/O)研究中不可或缺的臨床前模型，但它們對免疫檢查點抑制劑(ICIs)的反應(yīng)有限，這可能是由于它們的固有低免疫原性。為了解決這一問題，研究人員通過將雞卵清蛋白(OVA)這一高度免疫原性的蛋白質(zhì)表達到同源異體腫瘤細胞中，開發(fā)了新的免疫原性同源異體模型。這些模型，如DC2.4-OVA和B16-OVA，顯示出比它們的親本細胞系更慢的腫瘤生長速度，這可能是由于免疫介導(dǎo)的排斥反應(yīng)。更重要的是，這些OVA表達的模型對ICIs，特別是抗PD-1治療，表現(xiàn)出更高的敏感性，這表明它們在增強T細胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)方面具有潛力。此外，通過過繼T細胞轉(zhuǎn)移實驗，研究人員驗證了這些模型中存在腫瘤特異性記憶T細胞。這些結(jié)果表明，OVA工具細胞不僅增強了對ICIs的反應(yīng)，而且為臨床前免疫治療評估提供了新的、具有更高免疫原性的同源異體模型，這對于I/O研究具有重要的意義。

基本信息

英文標題：Dasatinib changes immune cell profiles concomitant with reduced tumor growth in several murine solid tumor models

中文標題：哮喘相關(guān)炎癥通過CCL11-CCR3通路促進乳腺癌細胞肺轉(zhuǎn)移

發(fā)表期刊：《Cancer Immunol Res》

影響因子：8.1

作者單位：

1.Hematology Research Unit Helsinki, Helsinki University Hospital Comprehensive Cancer Center, University of Helsinki, Finland

2.Research and Development, Bristol-Myers Squibb, Princeton, New Jersey, USA

3.Cancer Gene Therapy Group, Transplantation Laboratory, Pathology and HUSLAB, University of Helsinki, Finland

作者信息：Can Hekim, Mette Ilander, Jun Yan, Erin Michaud, Richard Smykra

研究背景

達沙替尼是一種廣譜酪氨酸激酶抑制劑(TKI)，已知在白血病治療中通過動員淋巴細胞和激活細胞毒性細胞發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。然而，其在實體瘤中的免疫效應(yīng)尚不明確。本研究旨在探究達沙替尼是否能在多種小鼠實體瘤模型(黑色素瘤、肉瘤、結(jié)腸癌、乳腺癌)中通過免疫調(diào)控抑制腫瘤生長，并解析其機制。重點關(guān)注達沙替尼對CD8+ T細胞浸潤、調(diào)節(jié)性T細胞(Tregs)及外周免疫細胞動態(tài)的影響。

研究方法

研究采用四種同源小鼠實體瘤模型(B16.OVA黑色素瘤、1956肉瘤、MC38結(jié)腸癌、4T1乳腺癌)，通過每日灌胃給予達沙替尼(30 mg/kg)或?qū)φ杖軇?。體外實驗評估達沙替尼對腫瘤細胞的直接毒性(MTT法、集落形成實驗)。免疫表型分析通過流式細胞術(shù)檢測外周血及腫瘤組織中的淋巴細胞亞群(CD8+ T細胞、NK細胞、Tregs)，并結(jié)合CyTOF質(zhì)譜技術(shù)對腫瘤浸潤免疫細胞進行深度分型。通過抗體耗竭實驗驗證T/NK細胞在抗腫瘤中的作用。

實驗結(jié)果

圖1：達沙替尼劑量依賴性誘導(dǎo)外周白細胞快速動員

單次給藥后1小時，達沙替尼(50-150 mg/kg)顯著增加外周血白細胞(WBC)及淋巴細胞比例(P<0.05)。在黑色素瘤模型中，30 mg/kg劑量組WBC增加5.36倍(對照組2.0倍，P=0.02)，表明達沙替尼可快速動員免疫細胞。

圖2：達沙替尼無直接細胞毒性但抑制體內(nèi)腫瘤生長體外實驗顯示達沙替尼(≤100 nM)對B16.OVA黑色素瘤細胞無直接殺傷作用(K562細胞敏感)，但體內(nèi)顯著抑制腫瘤體積(P=0.03)，提示其抗腫瘤效應(yīng)依賴免疫調(diào)節(jié)。

圖3：達沙替尼改變外周淋巴細胞表型

治療第8天，達沙替尼組外周CD8+ T細胞比例升高(16.6% vs. 13.2%，P=0.001)，NK細胞比例及活化標志物CD107a+ NK細胞增加(P=0.08)，顯示其對免疫細胞表型的動態(tài)調(diào)控。

圖4：達沙替尼促進CD8+ T細胞腫瘤浸潤并依賴T/NK細胞功能

免疫組化顯示達沙替尼組腫瘤內(nèi)CD8+ T細胞數(shù)量顯著增加(中位數(shù)17 vs. 4，P=0.03)，且T/NK細胞耗竭后其抗腫瘤效應(yīng)完全消失(P<0.006)。

圖5：達沙替尼廣譜抑制實體瘤生長

在肉瘤、結(jié)腸癌及乳腺癌模型中，達沙替尼均顯著抑制腫瘤生長(P<0.001)，體外僅高濃度(500 nM)對部分腫瘤細胞有輕微毒性，進一步支持其免疫依賴性。

圖6：CyTOF揭示腫瘤內(nèi)Tregs減少

達沙替尼治療組腫瘤內(nèi)FoxP3+ Tregs比例顯著下降(P<0.05)，CD4+ T細胞減少，單核細胞比例增加，提示其通過重塑腫瘤免疫微環(huán)境發(fā)揮療效。

研究結(jié)論

達沙替尼通過免疫調(diào)節(jié)顯著抑制多種實體瘤生長，其機制包括：快速動員外周血CD8+ T細胞并降低CD4/CD8比值，增加腫瘤內(nèi)CD8+ T細胞浸潤，同時減少調(diào)節(jié)性T細胞(Tregs)比例;T/NK細胞耗竭實驗證實其抗腫瘤作用完全依賴于免疫系統(tǒng)。在黑色素瘤、肉瘤、結(jié)腸癌及乳腺癌模型中均觀察到一致效果，且體外實驗顯示達沙替尼無直接細胞毒性。該研究支持達沙替尼作為免疫調(diào)節(jié)劑與其他療法聯(lián)用的潛力。