細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境，使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要用到各種細(xì)胞培養(yǎng)耗材，如培養(yǎng)器皿、培養(yǎng)瓶或者多孔培養(yǎng)板來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，那么不同規(guī)格的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、多孔培養(yǎng)板需要加多少培養(yǎng)基及可獲細(xì)胞量是多少呢？

培養(yǎng)器皿主要有培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、多孔培養(yǎng)板這三種。

各種培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿規(guī)格及加液量

細(xì)胞培養(yǎng)皿

培養(yǎng)皿是一種用于微生物或細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室器皿，由一個(gè)平面圓盤狀的底和一個(gè)蓋組成，一般用玻璃或塑料制成。培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類，主要為塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的，有一次性的和多次使用的，適合實(shí)驗(yàn)室接種、劃線、分離細(xì)菌的操作，可以用于植物材料的培養(yǎng)。

它最初由在德國(guó)生物學(xué)家羅伯特·科赫手下工作的細(xì)菌學(xué)家朱利斯·理查德·佩特里（Julius Richard Petri，1852-1921）于1887年設(shè)計(jì)，故又稱為“佩特里皿”。培養(yǎng)皿質(zhì)地脆弱、易碎，故在清洗及拿放時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎、輕拿輕放。使用完畢的培養(yǎng)皿最好及時(shí)清洗干凈，存放在安全、固定的位置，防止損壞、摔壞。

常見的玻璃或塑料培養(yǎng)皿，可以用于裝取、分離、處理組織，也可以用于細(xì)菌毒性、單細(xì)胞分離、同位素?fù)饺雽?shí)驗(yàn)。常見規(guī)格為10cm、9cm、6cm、3.5cm等。

細(xì)胞培養(yǎng)皿規(guī)格及加液量

細(xì)胞培養(yǎng)瓶

常見的為玻璃培養(yǎng)瓶，用于培養(yǎng)及繁殖細(xì)胞。國(guó)產(chǎn)的規(guī)格以容量(ml)標(biāo)識(shí)，進(jìn)口的則以底面積(c㎡)表示。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶常見的規(guī)格：培養(yǎng)面積25cm2（容量50ml）、培養(yǎng)面積75cm2（容量250ml）、培養(yǎng)面積175cm2（容量600ml）、其他還有12.5cm2,25ml；300cm2，850ml等。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶根據(jù)材質(zhì)可以分為玻璃的和塑料的，底部形狀有正方形、長(zhǎng)方形、三角形等，根據(jù)瓶子容積有5至500ml供選擇。另外，表面經(jīng)過(guò)特殊改性處理后，可以讓細(xì)胞更好的進(jìn)行貼壁培養(yǎng)，這樣根據(jù)細(xì)胞貼壁面積又可以分為25～175cm2多種。

培養(yǎng)瓶的瓶頸也有多種樣式，有直頸、斜頸、角度頸、三角形、矩形。

1）直頸：可以減少培養(yǎng)基因晃動(dòng)而流到瓶蓋里;

2）斜頸：易于傾注，移液管或者細(xì)胞刮容易進(jìn)入瓶體;

3）角度頸：移液管或者細(xì)胞刮易于進(jìn)入瓶身，并且可減少培養(yǎng)基因晃動(dòng)而流到瓶蓋;

4）三角形：移液管或細(xì)胞刮更易達(dá)到瓶角，寬底增加穩(wěn)定性;

5）矩形：斜頸的矩形培養(yǎng)瓶瓶底至瓶頸是一個(gè)坡度設(shè)計(jì)，易于傾注，移液管或者細(xì)胞刮容易進(jìn)入瓶體，大部分斜頸瓶都有一個(gè)裙邊以增加穩(wěn)定性。直頸和角度頸的矩形培養(yǎng)瓶整個(gè)瓶底都是培養(yǎng)面，節(jié)省空間并減少培養(yǎng)基因晃動(dòng)而流到瓶蓋。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶規(guī)格及加液量

細(xì)胞培養(yǎng)板

細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底（U型和V型）；培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536 孔等。

根據(jù)材質(zhì)的不同的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ā?/p>

細(xì)胞培養(yǎng)板規(guī)格及加液量

細(xì)胞培養(yǎng)板規(guī)格及加液量

24孔板： PLL 100-200μl （200μI）(即可，鋪板2h后，吸出PLL （回收）），PBS沖洗2次，晾干備用或不晾干直接用。加培養(yǎng)液量1ml，注意調(diào)整細(xì)胞密度。

25cm²(5m)→（1:2） 50cm²(10ml)一（1:3）75cm²（15ml）

2cm² （1ml） →1/25—1/40 總細(xì)胞懸液

96孔板：PLL20-40μl（40μl）即可，鋪板2h后，吸出PLL（回收），PBS沖洗2次，晾干備用或不晾干直按用。加培養(yǎng)液量0.1ml-0.2ml，注意調(diào)整細(xì)胞密度。

25cm² （5ml）→（1:2） 50cm² （10ml）一（1:3） 75cm² （15ml）

0.32cm² （0.1-0.2ml） →1/150— 1 /250總細(xì)胞懸液